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Atribución 4.0 Internacional.
INVESTIGACIÓN ORIGINAL / ORIGINAL RESEARCH
Visionarios en ciencia y tecnología 2023; 8:45-53.
1 Universidad Privada de Huancayo Franklin Roosevelt. Huancayo, Perú.
a Docente, Doctor, Químico Farmacéutico.ORCID: 0000-0002-8004-9212
b Docente, Magister, Químico Farmacéutico. ORCID 0000-0002-1656-7330
c Docente, Magister, Químico Farmacéutico. ORCID 0000-0002-2841-2248
Efecto ansiolítico del extracto hidroalcohólico de
Aeonium spathulatum “Rosa verde” en ratones
albinos – Huancayo – 2023.
Anxiolytic effect of the hydroalcoholic extract of Aeonium spathulatum “Rosa verde” in albino mice
- Huancayo – 2023.
Mónica Evencia Poma Vivas 1,a, Maricielo Orihuela Pomalaza 1,b, Emilio Palomino Ascencio 1,c
RESUMEN
Objetivo: Evaluar el efecto ansiolítico del extracto hidroalcohólico de Aeonium spathulatum “rosa
verde” en ratones albinos - Huancayo – 2023. Material y Métodos: Investigación aplicada de diseño
experimental con posprueba y grupo control, donde se manipularon tres grupos experimentales con
el extracto hidroalcohólico de Aeonium spathulatum “rosa verde”, el grupo estándar fue administrado
con diazepam y el grupo control recibió placebo. El efecto ansiolítico se analizó mediante ANOVA
unidireccional seguido de la prueba de Tukey. Los valores con p<0,05 se consideraron estadísticamente
signicativos. Resultados: Existen diferencias signicativas en el tiempo de permanencia del ratón en
los espacios abiertos y cerrados, en el grupo control y grupos experimentales respectivamente, siendo el
p valor ANOVA igual a 0,000. Según el análisis de Tukey, el grupo del diazepam, Aeonium spathulatum
“rosa verde” 250mg y Aeonium spathulatum “rosa verde” 500mg, muestran diferencia signicativa
p< 0,05 en comparación al grupo control y Aeonium spathulatum “rosa verde” 125mg. Conclusiones:
El extracto hidroalcohólico de Aeonium spathulatum en concentración de 250mg posee mayor efecto
ansiolítico después del diazepam.
Palabras clave: Ansiolíticos, rosa, prueba de laberinto elevado.
Visionarios en ciencia y tecnología. 2023; 8:45-53.
DOI: https://doi.org/10.47186/visct.v8i1.128
INVESTIGACIÓN ORIGINAL / ORIGINAL RESEARCH Poma Vivas M. et al.
Efecto ansiolítico del extracto hidroalcohólico de Aeonium
spathulatum “Rosa verde” en ratones albinos – Huancayo – 2023.
Visionarios en ciencia y tecnología. 2023; 8:45-53.
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ABSTRACT
Objective: To evaluate the anxiolytic effect of the hydroalcoholic extract of Aeonium spathulatum “rosa
verde” in albino mice - Huancayo - 2023. Material and Methods: Applied research of experimental
design with posttest and control group, where three experimental groups were manipulated with the
hydroalcoholic extract of Aeonium spathulatum “rosa verde”, the standard group was administered with
diazepam and the control group was given placebo. The anxiolytic effect was analyzed by unidirectional
ANOVA followed by the Tukey test. Values with p<0.05 were considered statistically signicant. Results:
There are signicant differences in the time of mouse permanence in the open and closed spaces, in the
control group and experimental groups respectively, being the p value ANOVA equal to 0.000. According
to Tukey’s analysis, the diazepam group, Aeonium spathulatum “green pink” 250mg and Aeonium
spathulatum “green pink” 500mg, show signicant difference p< 0.05 compared to the control group
and Aeonium spathulatum “green pink” 125mg. Conclusions: The hydroalcoholic extract of Aeonium
spathulatum in concentrations of 250mg has greater anxiolytic effect after diazepam.
Keywords: Anti-anxiety agents, rosa, elevated plus maze test.
INTRODUCCIÓN
Según la Organización Mundial de la Salud, la
prevalencia mundial de la ansiedad y la depresión
en el primer año de pandemia, aumentó en un
25%, siendo los más vulnerables los jóvenes y
las mujeres; aumentando el riesgo de suicidio,
comportamientos autodestructivos. Las mujeres
con patologías cardiacas, asma y cáncer, eran
las más propensas a estos trastornos mentales.
Esta situación se agravaba por la carencia de
acceso a servicios de salud mental, se percibe
que, en países de ingresos altos, solo un tercio de
la población con depresión recibe tratamientos
formales, en países de ingresos medianos a bajos
solo es de un 3% (1).
En Perú, entre el 30 y 40% de jóvenes de 19 y 26
años presentaron síntomas de ansiedad y depresión
tras la llegada de la pandemia de la COVID-19
(2). Los pacientes atendidos en el programa
“Te Cuido Perú” desde abril a octubre del 2020
reportaron algún tipo de trastorno mental, entre
ellos tenemos a la ansiedad 34,15%, depresión
25,22%, estrés agudo 13,81%, entre otros (3). En
Junín, los niveles de estrés, ansiedad y depresión
incrementaron en un 25%, según el informe de
la Dirección Regional de Salud, triplicándose las
atenciones en comparación al año 2019, entre
ellos el trastorno ansioso depresivo es el más
atendido (4).
La ansiedad generalizada se dene como un estado
de malestar caracterizado por intranquilidad,
expectación aprehensiva y aumento de la vigilancia
en ausencia de un estímulo desencadenante. Con
frecuencia se maniestan también reacciones
autonómicas, como sudoración, taquicardia,
alteraciones gastrointestinales, tensión muscular,
tremor e insomnio, entre otras(5).
Cuando un individuo se enfrenta a una situación
de peligro se puede observar un conjunto de
cambios conductuales y vegetativos orientado
a contender de manera adecuada con dicha
situación. Por lo tanto, la ansiedad representa
una estrategia adaptativa que proporciona al
organismo un mecanismo de alarma que lo
prepara para enfrentarse a una situación de
peligro. Entonces, la ansiedad también puede
denirse como uno de los procesos cerebrales
directamente involucrados en la sobrevivencia de
diferentes especies animales, especialmente de
aquellas que por su naturaleza son víctimas de los
depredadores (6, 7).
Con respecto a los neurotransmisores, uno que
está involucrado en la regulación de la ansiedad
es el GABA (ácido γ-aminobutírico), cuyo
receptor de mayor importancia es el GABA en el
que actúan las benzodiacepinas. Al activarse este
receptor, disminuye la excitabilidad neuronal y
produce una respuesta inhibitoria (8).
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Efecto ansiolítico del extracto hidroalcohólico de Aeonium
spathulatum “Rosa verde” en ratones albinos – Huancayo – 2023.
Existen tratamientos farmacológicos para la
ansiedad, entre los que destacan los barbitúricos,
metacualona y en algunas situaciones las
benzodiacepinas; así como presentan ventajas,
los efectos secundarios no tardan en llegar, por
ejemplo, la sedación, torpeza psicomotora,
amnesia y el síndrome de la abstinencia (9).
Por lo que las personas recurren a tratamientos
alternativos como la Fitoterapia, consiguiendo
efectos terapéuticos positivos y evitando
los efectos adversos que los tratamientos
convencionales pueden ocasionar.
Perú, considerado un país megadiverso, donde
las especies vegetales son utilizadas con
nes terapéuticos, se estima que el 80% de
la población reconoce a la toterapia como
recurso medicinal(10). La rosa verde es una
especie vegetal utilizada en medicina alternativa
principalmente en la región andina en problemas
del sistema nervioso con efecto ansiolítico y
sedante; los herboristas de Huancavelica la utilizan
en problemas de “susto” en medicina tradicional,
junto con otras plantas como el níspero, manzana,
rosa blanca, toronjil y claveles (11).
El objetivo de esta investigación fue evaluar el
efecto ansiolítico del extracto hidroalcohólico de
Aeonium spathulatum “rosa verde” en ratones
albinos - Huancayo – 2023.
MATERIAL Y MÉTODOS
El presente estudio fue aprobado por el Comité
Institucional de Ética en Investigación, de la
Universidad Privada de Huancayo Franklin
Roosevelt, corresponde a una investigación de tipo
aplicada y diseño experimental con posprueba y
grupo control, donde se consideró como variable
independiente al extracto hidroalcohólico de
Aeonium spathulatum “rosa verde” y la variable
dependiente al comportamiento ansioso. Para
lo cual, se recolectó 1Kg de droga vegetal
procedente del distrito de Viques, Huancayo,
Junín en horas de la mañana y enviándose una
muestra al Museo Historia Natural de la UNMSM
para su identicación taxonómica, garantizado el
estudio etnobotánico y uso medicinal. El material
restante fue utilizado para la preparación del
extracto hidroalcohólico, donde se lavó el material
vegetal con abundante agua, se sometió a secado
con aire a temperatura de 35°C durante 8 horas,
seguido del pulverizado de la droga seca con la
ayuda de un molino. El proceso de extracción de
metabolitos secundarios se realizó mediante la
maceración, donde se utilizó un envase de vidrio
ámbar e introdujeron 20g de droga seca con etanol
al 70% hasta cubrir la especie vegetal; dejándose
por un período de 48 horas en un lugar alejado
de la luz y a temperatura ambiente, agitándose
periódicamente. Transcurrido el tiempo se realizó
el proceso de concentración en el rotavapor, para
después pasar por la identicación cualitativa
de metabolitos secundarios con Tricloruro
férrico, Molish, Ninhidrina, Fehling, Shinoda,
Lieberman – Burchardt y Dragendorff, la prueba
de solubilidad se realizó con agua destilada
fría, agua destilada caliente, suero siológico y
Tween 20. Respecto a la variable manipulada,
estuvo conformada por 25 ratones albinos de
30 - 32 g obtenidos del Instituto Nacional de
Salud, aclimatados a condiciones estándar,
con alimentación balanceada y agua siguiendo
aspectos éticos para el cuidado y uso de animales
de experimentación, fueron separados en cuatro
grupos experimentales y un grupo control, en
grupos de 5 ratones cada grupo, donde los pesos
de cada uno sean aledaños uno con el otro. Con la
separación de los animales de experimentación se
obtiene el peso promedio para cada grupo (tabla
1).
Se preparó una solución madre del extracto seco
a una concentración de 500mg, a partir de esta
solución se prepararon otras dos concentraciones
de 250mg y 125 mg (tabla 2).
Según protocolo experimental el grupo 1: Grupo
control (suero siológico 0.9%), Grupo II:
Grupo estándar, fármaco de referencia diazepam
(10mg/5ml o 0.3ml/10gpeso), Grupo III: Extracto
de Aeonium spathulatum 125mg (0.1ml/10gpeso),
Grupo IV: Extracto de Aeonium spathulatum
250mg (0.1ml/10gpeso) y Grupo V: Extracto de
Aeonium spathulatum 500mg (0.1ml/10gpeso);
24 horas antes de la administración de cada
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tratamiento estuvieron bajo condiciones de ayuno
y separados en un ambiente tranquilo, sin ruido
y otros estímulos externos, a cada grupo de
experimentación se le administró el tratamiento
respectivo y se esperó 15 min para medir el efecto
ansiolítico, haciendo uso del método de prueba
de laberinto de Cruz, permite medir la ansiedad
y exploración en ratones mediante la tendencia
innata que tienen estos animales de evitar áreas
abiertas y elevadas. Para lo cual se elaboró un
laberinto en forma de cruz de 30cm de longitud,
con dos extremos cerrados y dos abiertos con
15cm de longitud cada extremo a una elevación
del piso de 38,5cm. Colocándose a cada ratón
de los grupos experimentales en el centro del
laberinto con dirección a uno de los extremos
abiertos y durante 5 min se cuanticó el tiempo
en el que permanecen cada uno de los extremos.
La disminución de la actividad exploratoria es
causada por el miedo a los espacios abiertos y
el uso de compuestos ansiolíticos incrementa
esta actividad; por lo que el efecto ansiolítico
se evidencia por el tiempo de permanecer en las
zonas abiertas (12).
Para el análisis estadístico se utilizó el análisis
de varianza (ANOVA) que permitió determinar
si existe diferencia estadísticamente signicativa
entre los grupos de experimentación y pruebas de
Tukey, con un nivel de signicancia de 0.05. Para
la presentación de datos se utilizó el software
estadístico SPSS (Stadistical Package for Socials
Sciences), versión 26.0.
RESULTADOS
El extracto hidroalcohólico de Aeonium
spathulatum “rosa verde” es muy soluble en agua
destilada caliente, soluble en suero siológico y
Tween 20; ligeramente soluble en agua destilada
fría (tabla 3).
El extracto hidroalcohólico de Aeonium spathulatum
“rosa verde” posee abundantes compuestos
fenólicos, carbohidratos, azúcares reductores y
aminoácidos, moderada cantidad de avonoides y
escasa cantidad de alcaloides (tabla 4).
Cuando el ratón está en espacios abiertos no
presenta comportamiento ansioso, es decir pierde
el miedo a la altura y el tiempo que permanece
en ese lugar aumenta; en cambio cuando siente
miedo y ansiedad se esconde en los brazos
cerrados y el tiempo que permanece en este lugar
aumenta (tabla 5).
Tiempo de permanencia en brazos abiertos (tabla
6):
Ho: No existe diferencias signicativas en
el tiempo que permanece el ratón en los
Tabla 1. Peso promedio para cada grupo de experimentación con su tratamiento respectivo
Peso (g) Grupo I
(Control)
Grupo II
(Diazepam)
Grupo III
(Dosis I)
Grupo IV
(Dosis IV)
Grupo V
(Dosis V)
Ratón 1 32 29 30 32 31
Ratón 2 31 30 30 32 30
Ratón 3 32 30 30 33 32
Ratón 4 32 30 30 31 29
Ratón 5 32 30 29 32 30
Ratón 6 33 31 31 32 31
Peso promedio (g) 32g 30g 30g 32g 30.5g
Tabla 2. Calculo de cantidad de extracto según concentración
Grupo Concentración Peso promedio
III 125mg (0.1ml/10gpeso) 30,0g
IV 250 mg(0.1ml/10gpeso) 32,0g
V 500mg(0.1ml/10gpeso) 30,5g
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spathulatum “Rosa verde” en ratones albinos – Huancayo – 2023.
Tabla 3. Prueba de solubilidad del extracto
hidroalcohólico de Aeonium spathulatum “rosa verde”
Agua destilada fría +
Agua destilada caliente +++
Suero siológico ++
Tween 20 ++
Tabla 4. Marcha toquímica del extracto hidroalcohólico de Aeonium spathulatum
“rosa verde”
Prueba de
caracterización
Constituyente
químico Resultado Evidencia
FeCl3 Compuestos fenólicos +++ Coloración verde
Mollish Carbohidratos +++ Anillo violeta
Fehling A y B Azúcares reductores +++ Precipitado naranja
Ninhidrina Aminoácidos +++ Coloración violeta
Shinoda Flavonoides ++ Coloración roja
Dragendorff Alcaloides + Precipitado rojizo
Tabla 5. Tiempo en segundos de estadía del ratón albino en brazos abiertos y cerrados, tomados en 5 min.
Ratón
Grupo I
(Control)
Grupo II
(Diazepam)
Grupo III
(Dosis I)
Grupo IV
(Dosis IV)
Grupo V
(Dosis V)
BA BC BA BC BA BC BA BC BA BC
1 95 205 143 157 100 200 125 175 113 187
2 82 218 140 160 94 206 128 172 116 184
3 103 197 155 145 102 198 117 183 100 200
4 98 202 142 158 101 199 129 171 99 201
5 101 199 139 161 102 198 130 170 115 185
BA: Brazos abiertos, BC: Brazos cerrados.
espacios abiertos en el grupo control y grupos
experimentales.
Ha: Existe diferencias signicativas en el tiempo
que permanece el ratón en los espacios abiertos
en el grupo control y grupos experimentales.
Se rechaza la hipótesis nula si el p<0.05, el
valor arrojado es de 0.000 por lo que se acepta
spathulatum “rosa verde” 125mg (tabla 7).
El grupo del diazepam posee mayor efecto
ansiolítico, seguidamente se encuentra la Aeonium
spathulatum “rosa verde” 250mg, Aeonium
spathulatum “rosa verde” 500mg Aeonium
Tabla 6. Demostración de diferencias signicativas de tiempo de permanencia en segundos del
ratón en los brazos abiertos con los cinco tratamientos
Suma de
cuadrados gl Media cuadrática F Sig.
Entre grupos 7932,160 4 1983,040 45,151 ,000
Dentro de grupos 878,400 20 43,920
Total 8810,560 24
la Ha, donde: Existe diferencias signicativas
en el tiempo que permanece el ratón en los
espacios abiertos en el grupo control y grupos
experimentales.
El grupo del diazepam, Aeonium spathulatum
“rosa verde” 250mg y Aeonium spathulatum “rosa
verde” 500mg, muestran diferencia signicativa
p< 0.05, frente al grupo control y Aeonium
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spathulatum “rosa verde” 125mg frente al grupo
control (gráco 1).
Tiempo de permanencia en brazos cerrados (tabla
8):
Ho: No existe diferencias signicativas en
el tiempo que permanece el ratón en los
espacios cerrados en el grupo control y grupos
experimentales.
Ha: Existe diferencias signicativas en el tiempo
que permanece el ratón en los espacios cerrados
en el grupo control y grupos experimentales.
Tabla 7: Demostración de efectividad ansiolítica de los grupos experimentales con prueba Tukey frente al grupo
control
Tratamiento Tratamiento Diferencia de
medias (I-J)
Desv.
Error Sig.
Intervalo de conanza al
95%
Límite
inferior
Límite
superior
Grupo control
Grupo Diazepam -48,000*4,191 ,000 -60,54 -35,46
Aeonium
spathulatum “rosa
verde” 125mg
-4,000 4,191 ,872 -16,54 8,54
Aeonium
spathulatum “rosa
verde” 250mg
-30,000*4,191 ,000 -42,54 -17,46
Aeonium
spathulatum “rosa
verde” 500mg
-12,800*4,191 ,044 -25,34 -,26
Gráco 1. Demostración de efectividad ansiolítica de los grupos experimentales frente a grupo control.
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Se rechaza la hipótesis nula si el p<0.05, el
valor arrojado es de 0.000 por lo que se acepta
la Ha, donde: Existe diferencias signicativas
en el tiempo que permanece el ratón en los
espacios cerrados en el grupo control y grupos
experimentales.
En el gráco 2 se demuestra que el ratón del grupo
control permanece mayor tiempo en espacios
cerrados seguidamente del Aeonium spathulatum
“rosa verde” 125mg.
DISCUSIÓN
El presente estudio tuvo como objetivo evaluar
el efecto ansiolítico del extracto hidroalcohólico
de Aeonium spathulatum “rosa verde” en ratones
albinos, para lo cual se analizó cualitativamente
los metabolitos secundarios que posee, siendo
las moléculas mayoritarias, los compuestos
fenólicos y avonoides. Estrada-Reyes et al.,
mencionan que los avonoides tienen efectos
sobre el Sistema Nervioso Central, al esfuerzo
de buscar sustancias naturales parecidas a las
benzodiacepinas, se estudiaron diversos principios
activos con estructuras químicas similares, es así
que se aisló la avona y la apigenina a partir de la
pasiora y manzanilla, estos avonoides poseen
actividad ansiolítica, por tener alta anidad por
el sitio de unión de las benzodiacepinas (13), otro
ejemplo es la valeriana que posee en sus extractos
avonoide 6-metilapigenina, que resulto unirse
al receptor GABA, demostrándose su actividad
tranquilizante e inductora del sueño.
Castañeda determinó el efecto sedante y
ansiolítico del extracto hidroalcohólico de
Solanum corneliomulleri, para demostrar el
Tabla 8. Demostración de diferencias signicativas de tiempo de permanencia en segundos del ratón en los
brazos cerrados con los cinco tratamientos
Tiempo Suma de
cuadrados gl Media
cuadrática F Sig.
Entre grupos 7932,160 4 1983,040 45,151 ,000
Dentro de grupos 878,400 20 43,920
Total 8810,560 24
Gráco 2. Demostración de permanencia en brazos cerrados de los grupos experimentales
frente al control.
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efecto ansiolítico se empleó un control positivo
de diazepam 10mg/Kg y grupo control negativo
agua destilada, las concentraciones de extracto
empleada fueron 5,10 y 15mg/Kg (14), las
moléculas mayoritarias según el análisis
cualitativo son los alcaloides. La dosis que logró
efecto ansiolítico después del control positivo fue
de 15mg/kg, para determinar el efecto ansiolítico
se utilizó el método de la placa agujereada, donde
al ratón se le coloca en el centro de la plataforma,
la evaluación se da en 5 min y se registra el
número de veces que el animal espía los oricios.
Leiva et al., determinaron el efecto ansiolítico de
Passiora salpoense, al grupo blanco administró
solución salina, al grupo control el diazepam
a 1mg/kg y a los grupos restantes el extracto
etanólico en 50mg/kg y 100mg/kg, ambas
concentraciones demostraron efecto ansiolítico
tras inducir ansiedad mediante la prueba de
enterramiento de canicas (15), en su composición
química encontramos avonoides, taninos,
triterpenos, entre otros En nuestro estudio también
se consideró el control positivo de diazepam y
el control negativo fue el de suero siológico,
respecto a las dosis de extracto hidroalcohólico
empleadas, la que tuvo mayor efecto ansiolítico
fue de 250mg.
Bonilla para detectar el efecto ansiolítico de
Erythrina berteroana utilizó el laberinto de
cruz elevado de 30cm de longitud, donde se
contabilizo el tiempo en que el ratón estaba
en los lugares abiertos y cerrados; el efecto
ansiolítico se evidencia cuando incrementa el
tiempo de permanencia en las zonas abiertas
(12). Rea utilizó también como medidor de efecto
ansiolítico el laberinto elevado, pero en forma de
cero, que le sirvieron para detectar la diminución
de los niveles de ansiedad tras la administración
de extracto hidroalcohólico de or de Psssiora
quadrangularis en dosis de 100%, 65% y 30%,
mostrando efectividad en las tres concentraciones
(16); por tal motivo en nuestro trabajo se evidencia
el efecto ansiolítico, ya que el ratón al permanecer
en zonas abiertas demuestra que no tiene miedo
realizar acción exploratoria.
CONCLUSIONES
Se evaluó el efecto ansiolítico de Aeonium
spathulatum siendo la concentración 250mg que
se administró con mayor efectividad, seguida de
500mg y 125mg.
Se identicaron los metabolitos primarios y
secundarios del extracto hidroalcohólico, siendo
los compuestos mayoritarios, los compuestos
fenólicos, carbohidratos, azúcares reductores,
aminoácidos y avonoides.
Se identicó la concentración ansiolítica con
mayor efectividad siendo la de 250mg.
El grupo 2 administrado con diazepam posee
mayor efectividad ansiolítica frente a los otros
grupos de trabajo.
Correspondencia:
Mónica Evencia Poma Vivas
Correo electrónico: mpoma@uroosevelt.edu.pe
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Disponible en: http://dspace.espoch.edu.ec/bitstream/
123456789/3793/1/56T00486%20UDCTFC.pdf
Recibido: 15/03/2023
Aceptado: 20/06/2023
